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新型冠状病毒(SARS-CoV-2)传播的溯源分析及启示 认领
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作者 王晓钰 崔立 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期149-156,共8页
由新型冠状病毒SARS-CoV-2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2)感染引起的疫情严重危害人类的生命安全,给社会造成巨大经济损失。目前,SARS-CoV-2从源头到感染人类过程中,哪些动物充当了传播媒介的角色尚未有定论。找到S... 由新型冠状病毒SARS-CoV-2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2)感染引起的疫情严重危害人类的生命安全,给社会造成巨大经济损失。目前,SARS-CoV-2从源头到感染人类过程中,哪些动物充当了传播媒介的角色尚未有定论。找到SARSCoV-2的动物宿主来源并切断传播途径是防控传染病的有效措施,对预防疫情再次发生、保障社会公共卫生安全具有重要意义。该文总结了SARS-CoV-2传播宿主的最新研究进展,并依据疫情事实推测SARS-CoV-2从蝙蝠到人类可能存在多个中间宿主。因此,在当前疫情防控乃至未来对新发传染病的防控中,基于同一健康创新理念加强人类医学-动物医学一体化防控体系建设至关重要。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 蝙蝠 中间宿主 同一健康
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一种新的犬胆管及十二指肠管插管模型的制作及可行性分析 认领
2
作者 邱智寅 艾晓杰 陈琼 《上海农业科技》 2019年第5期62-64,66共4页
研究药物在体内的排泄过程,能客观地了解候选药物对机体的作用,从而筛选活性高、安全性好的新药。现以比格犬为试验对象,在参考借鉴现有药理学和药效研究中比格犬胆管插管和代谢模型的基础上,建立了一种新的犬胆管及十二指肠管插管模型... 研究药物在体内的排泄过程,能客观地了解候选药物对机体的作用,从而筛选活性高、安全性好的新药。现以比格犬为试验对象,在参考借鉴现有药理学和药效研究中比格犬胆管插管和代谢模型的基础上,建立了一种新的犬胆管及十二指肠管插管模型,为探究该模型制作方法及操作可行性,特进行了相关试验。结果表明,该造模手术时间短、创伤小,术后犬活动不受限制,且能保持正常的生理机能和代谢水平,术后14 d,犬的各项指标即可恢复至术前正常水平。 展开更多
关键词 药物代谢 排泄 比格犬 犬胆管 十二指肠管 插管 模型
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崇明白山羊生长曲线的拟合与分析 认领
3
作者 陈新丹 朱勇 +4 位作者 顾卫东 张京 徐维娜 徐建雄 成建忠 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期79-83,共5页
本实验旨在研究崇明白山羊的生长发育规律。测定不同性别崇明白山羊0~18月龄的体重、体高、体长和胸围,采用Gompertz、Logistic和Von Bertalanffy 3种非线性生长模型进行生长曲线拟合。结果表明:3种模型均能较好地拟合崇明白山羊体重和... 本实验旨在研究崇明白山羊的生长发育规律。测定不同性别崇明白山羊0~18月龄的体重、体高、体长和胸围,采用Gompertz、Logistic和Von Bertalanffy 3种非线性生长模型进行生长曲线拟合。结果表明:3种模型均能较好地拟合崇明白山羊体重和体尺的生长曲线(R2>0.97),其中Von Bertalanffy模型的拟合效果最好(R2>0.99),但在0~2月龄的拟合效果较差,3种模型估计的公羊拐点月龄均迟于母羊;各月龄公羊体重、体高和体长均高于同期母羊,羔羊的日增重和相对生长率随着月龄的增加而逐渐下降。 展开更多
关键词 体重 体尺 生长曲线 模型 崇明白山羊
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猪流行性腹泻病毒SHpd/2012株Nsp8基因分析及真核表达 认领
4
作者 丁思嘉 罗依然 +7 位作者 周书亭 马世文 蒲良 杨亮 刘源平 蒋升瑶 叶力波利·达吾力 杨志彪 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第2期64-69,共6页
应用生物信息工具和分子克隆技术对PEDVSHpd/2012株Nsp8基因编码的蛋白进行了结构和功能分析以及体外表达。结果显示,NSP8蛋白是一个含有194个氨基酸的亲水性蛋白,不含信号肽和跨膜区。SHpd/2012毒株高度保守的NSP8氨基酸序列与CV777、A... 应用生物信息工具和分子克隆技术对PEDVSHpd/2012株Nsp8基因编码的蛋白进行了结构和功能分析以及体外表达。结果显示,NSP8蛋白是一个含有194个氨基酸的亲水性蛋白,不含信号肽和跨膜区。SHpd/2012毒株高度保守的NSP8氨基酸序列与CV777、AJ1102等毒株同源性高。NSP8蛋白也是一个单体蛋白,共有5个优势抗原表位。此外,本研究成功地在293T细胞内表达了NSP8蛋白,为进一步研究猪流行性腹泻病毒NSP8蛋白的功能提供了理论基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 Nsp8基因 真核表达
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氧化还原失衡对单增李斯特菌毒力基因转录水平的影响 认领
5
作者 史秀之 桑益暘 +3 位作者 涂光岚 孙建和 严亚贤 王恒安 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第1期25-30,共6页
保持氧化还原平衡对生物体维持其正常生理活动具有重要作用。单增李斯特菌是可以自身合成谷胱甘肽(glutathione,GSH)的革兰氏阳性菌,GSH可影响该菌毒力基因的转录。为了研究氧化还原平衡对于单增李斯特菌毒力基因转录水平的影响,利用氧... 保持氧化还原平衡对生物体维持其正常生理活动具有重要作用。单增李斯特菌是可以自身合成谷胱甘肽(glutathione,GSH)的革兰氏阳性菌,GSH可影响该菌毒力基因的转录。为了研究氧化还原平衡对于单增李斯特菌毒力基因转录水平的影响,利用氧化剂H2O2和还原剂GSH分别对单增李斯特菌进行氧化和还原应激,qRT-PCR检测毒力基因hly、actA和plcB的转录水平变化,结果表明,22mmol/LH2O2和10mmol/L低浓度GSH均能诱导毒力基因转录水平的显著上调,而22mmol/L高浓度GSH则抑制毒力基因的转录,表明在单增李斯特菌的氧化还原平衡调节能力范围之内,有效打破其氧化还原平衡,无论是氧化应激,还是还原应激,都可以促进其毒力基因的转录。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 谷胱甘肽 氧化应激 还原应激
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鸡TBK1基因实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用 认领
6
作者 李世雨 程玉强 +3 位作者 刘云霞 朱雯娴 孙建和 严亚贤 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第1期31-35,共5页
为测定鸡TBK1(chTBK1)基因在家禽抗感染天然免疫中mRNA表达水平变化情况,本研究根据chTBK1序列,设计3对特异性引物,基于chTBK1和β-actin双标准曲线建立了荧光定量PCR(qRT-PCR)检测方法,并测定在禽流感病毒刺激下鸡成纤维细胞(DF-1)中ch... 为测定鸡TBK1(chTBK1)基因在家禽抗感染天然免疫中mRNA表达水平变化情况,本研究根据chTBK1序列,设计3对特异性引物,基于chTBK1和β-actin双标准曲线建立了荧光定量PCR(qRT-PCR)检测方法,并测定在禽流感病毒刺激下鸡成纤维细胞(DF-1)中chTBK1表达量的变化情况。结果表明,建立的标准曲线Ct值与模板浓度的对数呈现良好的线性关系(R2均大于0.99),能特异地检测chTBK1,检测灵敏度可达59拷贝数/μL,且组内及组间变异系数小于2%;chTBK1在DF-1细胞中的mRNA水平在病毒刺激下呈现上升趋势。该qRT-PCR检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,为研究chTBK1在鸡抗病毒感染中的作用提供了有效工具。 展开更多
关键词 鸡TBK1 实时荧光定量PCR 双标准曲线
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腹泻仔猪肠道病毒组学分析 认领
7
作者 沈小娟 李晶娇 +3 位作者 边疆 赵婷婷 华修国 崔立 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期611-619,共9页
为了解上海周边地区腹泻仔猪肠道病毒组学特征,特别是冠状病毒流行情况,采用病毒宏基因组学方法对6个猪场的90份疑似病毒感染导致腹泻粪样进行检测,并通过Geneious和MEGA7.0等生物信息学软件对获得的完整的α冠状病毒属中的PEDV ORF3基... 为了解上海周边地区腹泻仔猪肠道病毒组学特征,特别是冠状病毒流行情况,采用病毒宏基因组学方法对6个猪场的90份疑似病毒感染导致腹泻粪样进行检测,并通过Geneious和MEGA7.0等生物信息学软件对获得的完整的α冠状病毒属中的PEDV ORF3基因序列进行遗传进化分析。数据显示,腹泻仔猪肠道病毒群落组成主要由小RNA病毒科( Picornaviridae )(63.67%)、星状病毒科( Astroviridae )(12.68%)、杯状病毒科( Caliciviridae )(4.07%)、细小病毒科( Parvoviridae )(2.51%)等组成。在唯一一个检测出PEDV阳性的猪场中,腹泻仔猪PEDV阳性率高达43.33%(13/30)。基因序列遗传进化分析显示,在本研究获得的3个PEDV ORF3基因序列中,有1个属于G2基因型,与其他参考PEDV病毒株相似性较高(96.44%~99.70%);另外2个ORF3基因序列属于G1基因型,相似性相对较低(95.11%~99.41%)。与PEDV传统株CV777蛋白序列比较分析发现,除piglet91株产生F2S突变以外,三株PEDV存在一致性突变,分别如下:V21A、I70M、V79I、F80V、L85I、L92F,这一特性,有可能是PEDV传统株与流行株基因型的鉴别依据。上海周边地区腹泻仔猪肠道病毒组成丰富,在不同猪群中,不同病原感染的情况有所差异,除了PEDV外,星状病毒和杯状病毒也是仔猪腹泻的主要病原。PEDV的ORF3基因与传统分离株相比具有独特的分子特征,新检测到的毒株突变位点与病毒毒力的关系有待于进一步研究。研究结果有助于了解腹泻仔猪肠道的病毒谱,并为仔猪病毒病防控提供一定的基础数据。 展开更多
关键词 腹泻仔猪 病毒宏基因组学 冠状病毒 猪流行性腹泻病毒 ORF3 突变
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2005—2017年全国3种主要蚊媒传染病发病数的圆形分布分析 认领 被引量:1
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作者 何业计 闫清源 +1 位作者 尔夏提江·阿迪力江 崔立 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第2期14-18,共5页
为探讨圆形分布法在分析我国流行性乙型脑炎(乙脑)、登革热及疟疾等3种蚊媒传染病季节特征方面应用的可行性,本研究采用圆形分布法对2005年至2017年间全国的乙型脑炎、登革热、疟疾的发病情况进行了整理分析,并用自回归移动平均模型(ARI... 为探讨圆形分布法在分析我国流行性乙型脑炎(乙脑)、登革热及疟疾等3种蚊媒传染病季节特征方面应用的可行性,本研究采用圆形分布法对2005年至2017年间全国的乙型脑炎、登革热、疟疾的发病情况进行了整理分析,并用自回归移动平均模型(ARIMA)验证。圆形分布法分析结果表明,乙脑、登革热、疟疾的预测发病高峰日分别为8月15日、10月5日和8月26日,高峰时期分别为7月11日至9月20日、9月9日至11月1日和6月12日至11月8日,ARIMA模型得到类似结果。因此,圆形分布法简单实用,对3种蚊媒传播疾病的防控具有较强的实用价值,从而为完善我国传染病的监测和防治工作提供参考依据。 展开更多
关键词 圆形分布法 自回归移动平均模型 流行性乙型脑炎 登革热 疟疾 季节特征
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不同地区致奶牛乳房炎金葡菌毒力因子的分布 认领 被引量:1
9
作者 张蕾 王曼 +2 位作者 何辉 王婷婷 朱建国 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第2期30-36,共7页
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)是引起奶牛乳房炎的重要病原,该致病菌主要通过毒力因子刺激乳腺组织引起炎症反应。为研究金黄色葡萄球菌重要毒力因子分布的地域性差异,本试验从上海以及云南的3个奶牛场采集奶样和环境污水,... 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)是引起奶牛乳房炎的重要病原,该致病菌主要通过毒力因子刺激乳腺组织引起炎症反应。为研究金黄色葡萄球菌重要毒力因子分布的地域性差异,本试验从上海以及云南的3个奶牛场采集奶样和环境污水,利用PCR技术对70株分离菌株和2株标准菌株进行检测。结果显示,在上海地区分离的18株金黄色葡萄球菌中,有7种毒力基因nuc(94.4%)、FnBPA(77.8%)、Hla(88.9%)、Hlb(94.4%)、ClfA(88.9%)、spa(61.1%)和coa(94.4%)的检出率超过50%;在云南分离到的19株金黄色葡萄球菌中,有8种毒力基因nuc(84.2%)、FnBPA(78.9%)、Hla(100%)、Hlb(78.9%)、ClfA(52.6%)、spa(78.9%)、set1(57.9%)和coa(84.2%)的检出率超过50%,这说明该8种毒力因子可能是致奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌中主要的毒力因子。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 金黄色葡萄球菌 毒力因子 地域差异性
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2株乳杆菌全发酵培养物及其组分的抗氧化能力分析 认领 被引量:1
10
作者 钟丘实 李莉 +3 位作者 陈新丹 张京 徐维娜 徐建雄 《生物技术进展》 2019年第3期290-295,共6页
为了研究植物乳杆菌 Lactobacillus plantarum CGMCC 1.557和干酪乳杆菌 Lactobacillus casei CGMCC 1.570的全发酵培养物及其组分的抗氧化能力,分别制备2株菌的全发酵培养物、发酵上清液、菌体悬浮液及胞内提取物,随后测定其对3种自由... 为了研究植物乳杆菌 Lactobacillus plantarum CGMCC 1.557和干酪乳杆菌 Lactobacillus casei CGMCC 1.570的全发酵培养物及其组分的抗氧化能力,分别制备2株菌的全发酵培养物、发酵上清液、菌体悬浮液及胞内提取物,随后测定其对3种自由基( DPPH ·、 O 2 ·^-、· OH )的清除率以及其中3种抗氧化酶的活性,包括总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px),进而评价2株菌的全发酵培养物及其组分的抗氧化能力。结果表明,植物乳杆菌和干酪乳杆菌的全发酵培养物都具有较强的清除自由基的能力和较高的T-SOD、GSH-Px活性;2株菌的发酵上清液对 DPPH ·、 O 2 ·^-的清除率和T-SOD活性显著高于菌体悬浮液和胞内提取物( P <0.05);2株菌的菌体悬浮液对· OH 的清除率显著高于其他组分( P <0.05)。研究表明,植物乳杆菌 L. plantarum CGMCC 1.557和干酪乳杆菌 L. casei CGMCC 1.570 都具有较高的抗氧化能力,而其抗氧化能力主要源于发酵上清液和菌体,研究结果为进一步开发抗氧化乳杆菌产品提供了理论依据。 展开更多
关键词 乳杆菌 培养物及其组分 自由基清除率 抗氧化酶活性
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NAC抑制镉离子诱导的小鼠精子DLD酪氨酸磷酸化作用 认领
11
作者 文艺 杨强震 +6 位作者 李思思 陈俊 刘旭睿 刘桓 李培飞 王立蕊 李新红 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第2期37-46,共10页
重金属镉是环境中广泛存在的污染物,对机体生殖系统有很强的毒性作用。镉能诱导精子细胞蛋白二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLD)发生酪氨酸磷酸化修饰,但机制尚不清楚。本研究利用蛋白免疫印迹技术探讨镉离子对小鼠生殖系统的毒性作用、镉诱导生... 重金属镉是环境中广泛存在的污染物,对机体生殖系统有很强的毒性作用。镉能诱导精子细胞蛋白二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLD)发生酪氨酸磷酸化修饰,但机制尚不清楚。本研究利用蛋白免疫印迹技术探讨镉离子对小鼠生殖系统的毒性作用、镉诱导生殖细胞蛋白发生酪氨酸磷酸化修饰的机理及抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对精子的保护作用。结果表明,镉离子能减弱生殖细胞的能量代谢水平,从而抑制睾丸的生长发育并导致产仔数下降;镉离子能特异性诱导精子DLD蛋白发生酪氨酸磷酸化修饰,且与钙离子具有协同作用。此外,NAC可在体外有效抑制DLD蛋白发生酪氨酸磷酸化从而抑制镉的生殖毒性,并恢复精子能量水平和活力参数。本研究从NAC抑制镉离子诱导特异性蛋白磷酸化修饰的角度,揭示NAC保护作用机制,旨在为镉离子生殖毒理学研究及疾病防治提供理论基础。 展开更多
关键词 小鼠精子 二氢硫辛酰胺脱氢酶 磷酸化 N-乙酰-L-半胱氨酸
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LLC-PK1细胞中LDHB蛋白的体外表达及小RNA干扰 认领
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作者 罗依然 周书亭 +8 位作者 杨亮 刘源平 蒋升瑶 叶力波利·达吾力 王子泓 罗渝宵 邹霭萱 崔立 杨志彪 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第6期87-93,共7页
为了观察与猪流行性腹泻病毒(PEDV)NSP12互作蛋白乳酸脱氢酶B(LDHB)的体外表达情况和小RNA干扰效果,构建了真核表达载体pcDNA4.0-LDHB-3*Flag,并在Vero细胞中过表达LDHB,发现在37 kDa处有大小相符的明显条带。设计的2条小干扰RNA能降低L... 为了观察与猪流行性腹泻病毒(PEDV)NSP12互作蛋白乳酸脱氢酶B(LDHB)的体外表达情况和小RNA干扰效果,构建了真核表达载体pcDNA4.0-LDHB-3*Flag,并在Vero细胞中过表达LDHB,发现在37 kDa处有大小相符的明显条带。设计的2条小干扰RNA能降低LLC-PK1细胞中LDHB的mRNA和蛋白质水平,经one-way ANOVA检验证明干扰实验组2-ΔΔct的平均值显著低于对照组(P<0.05)。该结果为研究LDHB在PEDV感染LLC-PK1和Vero细胞过程中的作用提供了基础数据。 展开更多
关键词 LDHB 真核表达 小RNA干扰
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猪链球菌9型噬菌体裂解酶Ply5218最小功能域及关键氨基酸位点的鉴定 认领
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作者 刘洋 王兆飞 +2 位作者 孔里程 严亚贤 孙建和 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第1期41-46,共6页
为了鉴定猪链球菌9型噬菌体裂解酶Ply5218的最小活性功能域及关键氨基酸位点,利用PCR技术对全长裂解酶Ply5218进行截短并对可能与活性相关的关键氨基酸位点进行定点突变,研究截短与突变后各个蛋白的活性并与全长蛋白活性对比。结果显示... 为了鉴定猪链球菌9型噬菌体裂解酶Ply5218的最小活性功能域及关键氨基酸位点,利用PCR技术对全长裂解酶Ply5218进行截短并对可能与活性相关的关键氨基酸位点进行定点突变,研究截短与突变后各个蛋白的活性并与全长蛋白活性对比。结果显示,截短片段Ply52181-147可在平板上形成裂菌圈,仍保持裂菌活性,而比该片段更短的截短片段则失去裂菌活性,推测Ply52181-147为Ply5218的最小活性相关功能域;第8、58、136和142位点的氨基酸突变后,裂菌活性部分降低,第34和144位点的氨基酸突变后,则彻底失去裂菌活性。研究结果为深入揭示Ply5218的裂菌机制和进一步改造裂解酶提供了基础数据。 展开更多
关键词 猪链球菌 裂解酶 最小活性功能域 关键氨基酸位点
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一株可裂解阴沟肠杆菌的T7样噬菌体的分离鉴定及基因组分析 认领
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作者 单文雅 王兆飞 +4 位作者 杨登辉 刘云霞 王恒安 严亚贤 孙建和 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第1期74-80,86共8页
利用双层琼脂平板法,从上海地区某奶牛养殖场环境样品中分离、纯化一株针对阴沟肠杆菌的裂解性噬菌体,命名为vB_Ecop_S523(S523),可形成圆形、透明、边缘整齐的噬菌斑。透射电镜(TEM)观察显示,噬菌体头部直径约为58~59nm,尾部较短,属于P... 利用双层琼脂平板法,从上海地区某奶牛养殖场环境样品中分离、纯化一株针对阴沟肠杆菌的裂解性噬菌体,命名为vB_Ecop_S523(S523),可形成圆形、透明、边缘整齐的噬菌斑。透射电镜(TEM)观察显示,噬菌体头部直径约为58~59nm,尾部较短,属于Podoviridae科。该噬菌体最佳感染复数为0.1,潜伏期为5min,裂解量为90PFU/感染细胞。酶切鉴定S523的核酸类型为双链DNA。测序结果表明,其基因组大小为39,825bp,G+C含量为48.8%。同源进化分析显示该噬菌体属于T7样噬菌体新成员。上述结果为研究阴沟肠杆菌抑菌制剂提供了新的实验材料。 展开更多
关键词 阴沟肠杆菌 T7样噬菌体 生物学特性 基因组分析
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鸭IFN-β启动子双荧光素酶报告基因系统的构建及活性检测 认领
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作者 高全新 刘云霞 +2 位作者 程玉强 严亚贤 孙建和 《上海农业学报》 CSCD 2018年第3期66-71,共6页
通过PCR方法扩增获得6个不同长度的鸭IFN-β启动子DNA片段,并连接至萤火虫荧光素酶报告质粒p GL3.0,构建包含6个鸭IFN-β启动子的报告质粒。分别将构建的报告质粒与内参报告质粒p RL-TK转染至DEF细胞,检测报告质粒在不同刺激下的荧光素... 通过PCR方法扩增获得6个不同长度的鸭IFN-β启动子DNA片段,并连接至萤火虫荧光素酶报告质粒p GL3.0,构建包含6个鸭IFN-β启动子的报告质粒。分别将构建的报告质粒与内参报告质粒p RL-TK转染至DEF细胞,检测报告质粒在不同刺激下的荧光素酶活性。结果表明:包含鸭IFN-β启动子全长的报告质粒p GL-IFN-β-1593能够有效地被相应刺激物激活;截短研究表明,包含390 bp鸭IFN-β启动子的报告质粒p GL-IFN-β-453的荧光素酶活性与全长基本一致,且一定程度上可降低冗余碱基的不良影响,因此选取该质粒用于鸭IFN-β启动子活性检测。本研究建立的基于荧光素酶双报告基因系统的鸭IFN-β启动子活性检测方法,为后续鸭IFN-β通路研究提供了检测工具。 展开更多
关键词 IFN-β启动子 双荧光素酶报告基因
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牛源金黄色葡萄球菌单链抗体治疗小鼠乳腺炎效果评价 认领 被引量:1
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作者 王婷婷 黄慧华 +4 位作者 王曼 张凡庆 王凤青 张波 朱建国 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第4期111-115,共5页
引起奶牛乳腺炎的原因复杂多样,金黄色葡萄球菌是其中重要的病原之一。为探寻治疗奶牛乳腺炎的抗生素替代性生物制剂,本研究利用建立的小鼠金黄色葡萄球菌感染乳腺炎模型,将针对金黄色葡萄球菌牛源性单链抗体(scFv)的真核表达质粒pcDN... 引起奶牛乳腺炎的原因复杂多样,金黄色葡萄球菌是其中重要的病原之一。为探寻治疗奶牛乳腺炎的抗生素替代性生物制剂,本研究利用建立的小鼠金黄色葡萄球菌感染乳腺炎模型,将针对金黄色葡萄球菌牛源性单链抗体(scFv)的真核表达质粒pcDNA3.1-scFv33和pcDNA3.1-scFv73经第4对乳腺导管注入到处于泌乳期的乳腺炎模型小鼠的乳腺中,以通过scFv在小鼠乳腺内的表达来抑制细菌对乳腺上皮细胞的黏附从而达到防治乳腺炎的目的。结果显示,两个scFv治疗组乳腺内的细菌数量分别为4.52±0.37、4.38±0.32(lgcfu·mg-1),TNF-α的含量分别为29.55和42.29 pg/mg,IL-6的含量分别为48.38和21.74 pg/mg。与阴性对照组相比,scFvs治疗组乳腺内的细菌数量显著减少(P〈0.05),乳腺组织较完整,减少了炎性细胞的浸润,且TNF-α和IL-6的含量均显著降低(P〈0.05)。表明pcDNA3.1-scFvs对小鼠乳腺炎可能具有一定程度的保护作用,为进一步研究防治奶牛乳腺炎的抗生素替代性生物制剂探索了新途径。 展开更多
关键词 乳腺炎 SCFV 金黄色葡萄球菌 TNF-α IL-6
核酸适配体在真菌毒素检测中研究进展 认领
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作者 李世雨 傅强 严亚贤 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期616-620,共5页
核酸适配体是指在体外利用指数富集的配基系统进化技术筛选得到的核酸(DNA或RNA)片段。基于核酸适配体的检测方法具有特异性高、稳定性好、易于修饰等优点,在真菌毒素检测领域得到了广泛的关注和应用。本文在传统检测方法的基础上,... 核酸适配体是指在体外利用指数富集的配基系统进化技术筛选得到的核酸(DNA或RNA)片段。基于核酸适配体的检测方法具有特异性高、稳定性好、易于修饰等优点,在真菌毒素检测领域得到了广泛的关注和应用。本文在传统检测方法的基础上,着重介绍核酸适配体在真菌毒素检测领域中的研究进展,并提出目前存在的问题及发展趋势。 展开更多
关键词 核酸适配体 真菌毒素 检测
猪流行性腹泻病毒SHpd/2012株侵染Vero细胞特性分析 认领
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作者 谢洋洋 丁思嘉 +2 位作者 郑煜明 罗依然 杨志彪 《上海交通大学学报:农业科学版》 2018年第2期16-21,共6页
为了探究PEDV(猪流行性腹泻病毒)流行毒株SHpd/2012侵染细胞的特性,研究采用IFA(间接免疫荧光)及绘制病毒一步生长曲线等方法,对感染PEDV SHpd/2012株后的Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)病变过程进行研究.结果发现,CPE(细胞病变)主... 为了探究PEDV(猪流行性腹泻病毒)流行毒株SHpd/2012侵染细胞的特性,研究采用IFA(间接免疫荧光)及绘制病毒一步生长曲线等方法,对感染PEDV SHpd/2012株后的Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)病变过程进行研究.结果发现,CPE(细胞病变)主要表现为细胞肿胀、变圆、皱缩、聚集成合胞体甚至从培养瓶壁大量脱落.IFA结果显示,接毒后12 h病毒开始增殖,在接毒后36 h时感染细胞数量最多,其后病毒增殖速度逐步下降,60 h时趋于平稳.病毒一步生长曲线结果显示,SHpd/2012株感染细胞后24-60 h的毒价一直处于较高水平,60 h后开始下降.此外,本研究成功克隆并真核表达了PEDV S蛋白,为研究PEDV与受体蛋白的互作及病毒的致病机制奠定基础. 展开更多
关键词 PEDV(猪流行性腹泻病毒) 侵染细胞 S基因 真核表达
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PAR-2在哺乳动物肠道炎症中的作用机制研究进展 认领
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作者 王凤青 张波 +5 位作者 张凡庆 王曼 王婷婷 张蕾 管玉 朱建国 《动物医学进展》 北大核心 2018年第10期87-90,共4页
越来越多的研究表明,蛋白酶激活受体2(PAR-2)在哺乳动物肠道炎症中发挥重要作用。近些年来备受关注的是PAR-2被激活以后其促炎作用和抗炎作用两方面。在小鼠结肠炎模型中,PAR-2的激活可促进肠道上皮细胞损伤、使肠道分泌增加、肠黏... 越来越多的研究表明,蛋白酶激活受体2(PAR-2)在哺乳动物肠道炎症中发挥重要作用。近些年来备受关注的是PAR-2被激活以后其促炎作用和抗炎作用两方面。在小鼠结肠炎模型中,PAR-2的激活可促进肠道上皮细胞损伤、使肠道分泌增加、肠黏膜通透性增高、平滑肌松弛以及促炎性细胞因子表达上调等发挥促炎作用。然而,有研究表明,PAR-2被激活以后使辅助性T细胞1型细胞因子表达下调,可以减轻炎症,发挥抗炎作用。论文主要对目前PAR-2在多种哺乳动物肠道炎症疾病中的研究进展进行综述,探索肠道炎症中PAR-2的作用机制,为该病的治疗寻找新的路经。 展开更多
关键词 蛋白酶激活受体2 肠道炎症 激动剂 胰蛋白酶 类胰蛋白酶
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华东地区猪圆环病毒2型基因型鉴别及ORF2遗传变异分析 认领 被引量:1
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作者 王苗苗 王婷婷 朱建国 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第7期92-97,共6页
利用PCR方法对2014-2015年采集于华东地区部分猪场的病料进行猪圆环病毒2型(PCV2)检测,将所得阳性样品进行2a/2b鉴别分型。同时,选取15份阳性样品扩增ORF2完整序列,并利用DNAStar软件进行同源性分析和系统进化树分析。结果表明,335份... 利用PCR方法对2014-2015年采集于华东地区部分猪场的病料进行猪圆环病毒2型(PCV2)检测,将所得阳性样品进行2a/2b鉴别分型。同时,选取15份阳性样品扩增ORF2完整序列,并利用DNAStar软件进行同源性分析和系统进化树分析。结果表明,335份病料中PCV2阳性样品146份,其中PCV2a型11份(7.53%)、PCV2b型127份(86.99%),共感染率5.48%,说明华东地区感染的PCV2以2b基因型为主,少数为2a基因型。同源性分析表明,试验所得15株ORF2序列同源性为89.9%~99.9%,与国内外参考毒株同源性为86.2%~99.7%,均存在较高的同源性。系统进化树表明,15株序列中有9株属于PCV2b型,4株属于PCV2d型,2株属于PCV2a型,未出现2c和2e基因型。本试验为进一步研究PCV2遗传变异趋况及新型疫苗的研制积累了有效材料。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 鉴别分型 ORF2 序列分析
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